Nghiên cứu ứng dụng nano từ trong phân tích beta-hCG
Qui trình phân tích protein beta-hCG bằng phương pháp miễn dịch huỳnh quang sử dụng nano từ được nghiên cứu và một số điều kiện thực nghiệm đã được tối ưu hóa. Phương pháp có độ lặp tốt (CV 2,87%) với giới hạn phát hiện LOD và giới hạn định lượng LOQ tương ứng là 3,44 và 14,2 g/L.
Ảnh minh họa: Internet
Trước thực trạng bùng nổ của căn bệnh ung thư như hiện nay, việc tầm soát để phát hiện bệnh sớm giúp nâng cao tỉ lệ điều trị thành công là vô cùng có ý nghĩa đối với người bệnh. Trong lĩnh vực khoa học sự sống, các nhà khoa học không ngừng nghiên cứu phát triển các phương pháp phân tích nhằm nâng cao độ nhạy, độ chính xác, độ đặc hiệu với mục đích phát hiện sớm nhất có thể dấu hiệu các loại bệnh ung thư. Trong số đó, phương pháp phân tích miễn dịch, thường được sử dụng trong các phòng phân tích y sinh, là phương pháp sử dụng phản ứng giữa kháng thể hoặc phân tử giống kháng thể với chất cần phân tích. Do tính đặc hiệu của phản ứng rất cao nên phương pháp phân tích này có độ chọn lọc cũng rất cao, có thể ứng dụng với các mẫu có thành phần phức tạp như các dịch sinh học, máu, huyết thanh, nước tiểu…
Hạt nano từ đã và đang được được ứng dụng ngày càng rộng rãi như trong nhiều lĩnh vực, đặc biệt là các lĩnh vực có liên quan đến y học như chẩn đoán hình ảnh, chất dẫn thuốc, điều trị ung thư.... và là vật liệu tiềm năng trong lĩnh vực phân tích y sinh. Nếu có thể biến tính hạt nano từ cho phù hợp với các kháng thể, biến chúng thành các chất mang kháng thể có thể di chuyển để bắt cặp với các protein đích sau đó cố định chúng bằng từ trường để xác định các tín hiệu dò tương ứng. Nhờ khả năng phân lập và làm sạch các protein chỉ dấu ung thư (hay chỉ dấu một số dị tật bẩm sinh của thai nhi) dễ dàng hơn, giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phép phân tích được cải thiện, cho phép xác định chúng trong mẫu thực tế ở nồng độ rất thấp. Ngoài ra, việc sử dụng hạt nano từ trong phân tích mẫu thực cũng cho phép triển khai công nghệ tự động hoá, phân tích nhanh hàng loạt mẫu, tiết kiệm thời gian công sức và chi phí nhưng vẫn đảm bảo tính chính xác.
Trong nghiên cứu này, hạt nano từ phủ streptavidin thương mại MNP-SA (chuyên dùng trong cố định các kháng thể đặc hiệu trong phân tích miễn dịch) được nghiên cứu ứng dụng trong xây dựng qui trình xác định beta-hCG theo phương pháp huỳnh quang. hCG là một hooc-môn nội tiết tố được sản sinh bởi nhau thai ở các thai phụ hoặc bởi một số tế bào ung thư. Nếu người không mang thai mà hàm lượng hCG trong máu cao thì có thể dẫn đến chẩn đoán ung thư.
Đã khảo sát được điều kiện tối ưu để thực hiện phản ứng miễn dịch huỳnh quang phân tích nồng độ β-hCG: tỉ lệ pha loãng dung dịch Ab β-hCG–biotin 1:20, thời gian ủ mẫu 20 phút, rửa sản phẩm 3 lần. Việc đánh giá độ lặp, độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp đều cho kết quả tốt, cho thấy khả năng áp dụng phương pháp để phân tích các mẫu thực tế. Kết luận này cũng đã được khẳng định với kết quả phân tích các mẫu máu của thai phụ trong giai đoạn thứ hai của thai kì.
nnttien
Tạp chí KH&CN - Trường Đại học Công nghiệp Hà Nội, Số 50/2019 (nnttien)